雪灵芝多糖的分离纯化及免疫活性评价

doi:10.16333/j.1001-6880.2019.4.003

天然产物研究与开发 ›› 2019, Vol. 31 ›› Issue (4): 572-578.doi: 10.16333/j.1001-6880.2019.4.003

雪灵芝多糖的分离纯化及免疫活性评价

连紫宛1，李占强2,3，张海燕4，刘瑞欣1，陈辛玲1，王刚1*

1青海大学医学院；2青海大学医学院高原医学研究中心；3青海省高原医学应用基础重点实验室青海-犹他高原医学联合重点实验室；4青海省第五人民医院，西宁 810000

出版日期:2019-04-29 发布日期:2019-04-29
基金资助:
青海省科技厅基础研究项目（2016-ZJ-782）

Isolation of polysaccharides from Arenaria kansuensis and evaluation of immunological activity

LIAN Zi-wan1,LI Zhan-qiang2,3,ZHANG Hai-yan4,LIU Rui-xin1,CHEN Xin-ling1,WANG Gang1*

1Medical College of Qinghai University; 2 Research Center for High Altitude Medicine,Qinghai University; 3Key Laboratory of Application and Foundation for High Altitude Medicine Research in Qinghai Province (Qinghai-Utah Joint Research Key Lab for High Altitude Medicine); 4The Fifth People's Hospital of Qinghai Province,Xining 810000,China

Online:2019-04-29 Published:2019-04-29

摘要/Abstract

摘要： 为分离纯化雪灵芝（Arenaria kansuensis）多糖，并对纯化组分进行分子量测定、单糖组分分析及免疫活性评价。实验采用水提醇沉法提取雪灵芝粗多糖（Arenaria kansuensis crude polysaccharide， AKCP）；以DEAE-52纤维素柱对AKCP进行分离纯化，获得5个雪灵芝多糖组分AKP-1~AKP-5，进一步采用葡聚糖凝胶 G-75柱对AKP-2进行分离纯化获得AKP-2a多糖组分。苯酚-硫酸法测定AKCP、AKP-2及AKP-2a的总糖含量分别为52%、70% 和 79%；凝胶渗透色谱-十八角度激光光散射（GPC-MALS）法检测AKP-2a的重均分子量Mw为2.07× 10⁵Da、数均分子量Mn为9.838× 10⁴Da；HPLC法检测AKP-2a是由半乳糖醛酸、甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖10种单糖组成，其摩尔比为1∶0.25∶0.01∶0.20∶0.11∶0.25∶0.61∶0.07∶0.21∶0.12；以MTT法检测体外培养小鼠脾淋巴细胞增殖，AKCP、AKP-2及AKP-2a各浓度组SI水平，均明显高于对照组（P<0.05）。经NO释放实验及IFN-γ ELISA检测，AKP-2a各浓度组小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中二者的水平，较对照组呈浓度依赖性增高（P<0.01）。综上结果，本研究通过分离纯化，获得了总糖含量较高的雪灵芝多糖AKP-2a组分,初步确定其分子量范围及单糖组成，并证实其具有激活淋巴细胞增殖、促进巨噬细胞功能的生物活性。

关键词: 雪灵芝, 多糖, 纯化, 免疫激活

Abstract: In order to isolate and purify Arenaria kansuensis polysaccharide from natural Arenaria kansuensis,and study its molecular weight,monosaccharide component and immune activity,Arenaria kansuensis crude polysaccharide (AKCP) was extracted by water extraction and alcohol precipitation,and separated and purified into AKP-1-AKP-5 by DEAE cellulose 52 column.AKP-2 was further purified using Sephadex G-75 column and AKP-2a polysaccharide component was obtained.The total sugar content of AKCP,AKP-2 and AKP-2a was measured as 52%,70% and 79% respectively by phenol-sulfuric acid method.The GPC-MALS was applied to measure the molecular weight of AKP-2a.Results showed that the weight-average molecular weight (Mw) of AKP-2a was 2.07× 10⁵Da,and the number-average molecular weight (Mn) was 9.838× 10⁴ Da.The 10 main monosaccharides in AKP-2a detected by HPLC are galacturonic acid,mannose,ribose,rhamnose,glucuronic acid,glucose,galactose,xylose,arabinose and fucose,the molar ratio of which was 1∶0.25∶0.01∶0.20∶0.11∶0.25∶0.61∶0.07∶0.21∶0.12 respectively.Compared with control group,the AKCP,AKP-2 and AKP-2a treatment groups with high,medium and low concentrations had a promoting effect on the proliferation of mice spleen lymphocytes by MTT in vitro (P<0.05).By NO release experiment and ELISA detection,AKP-2a showed a concentration dependent activation effect on mice peritoneal macrophages in vitro (P<0.01)． In conclusion,this study obtained AKP-2a polysaccharide through isolation and purification of Arenaria kansuensis,which has a high total sugar content.The multiple monosaccharides and the molecular weight of AKP-2a were identified,and the preliminary results showed that AKP-2a had the biological activities on lymphocyte proliferation andmacrophage function.

Key words: Arenaria kansuensis, polysaccharide, purification, immune activation

中图分类号:

R284.2 R965

连紫宛1，李占强2,3，张海燕4，刘瑞欣1，陈辛玲1，王刚1*. 雪灵芝多糖的分离纯化及免疫活性评价[J]. 天然产物研究与开发, 2019, 31(4): 572-578.

LIAN Zi-wan1,LI Zhan-qiang2,3,ZHANG Hai-yan4,LIU Rui-xin1,CHEN Xin-ling1,WANG Gang1*. Isolation of polysaccharides from Arenaria kansuensis and evaluation of immunological activity[J]. NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT, 2019, 31(4): 572-578.

[1]	代千千, 胡娜, 王洪伦, 丁晨旭. 中国被毛孢亚临界水提取多糖结构特征及抗氧化活性[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(增刊2): 46-54.
[2]	冯丹, 龙若兰, 李佩佩, 李朵, 孙菁. 唐古特大黄非药用部位多糖脱色工艺及其抗氧化活性研究[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(增刊2): 76-83.
[3]	刘婷婷. 水飞蓟宾的植物来源、提取方法和抗癌活性研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(增刊2): 154-163.
[4]	边雷, 梁雨晨, 沈彤. 油橄榄叶中黄酮类成分的研究[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(增刊1): 49-53.
[5]	廖彩玉, 吴丽艳, 王兰英, 孟凡欣. 食用菌多糖对酒精性肝病调节作用研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(增刊1): 165-174.
[6]	徐慧颖, 丁奕辉, 董昊, 赵雪岑, 柏阳, 才谦. 苍术多糖与正丁醇部位对脾虚大鼠线粒体自噬的影响[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(8): 1372-1379.
[7]	刘晓燕, 龙凤, 赵玉, 侯茜, 叶海琳, 周旋, 李雪. 基于PI3K/Akt/GSK-3β通路探讨蒲公英多糖对三阴性乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(7): 1135-1143.
[8]	叶明玉, 吕建华, 董婧, 李世玉, 王辛, 李长田. 真菌出芽短梗霉中一个新的酚苷类化合物[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(6): 966-972.
[9]	海力茜·陶尔大洪, 李欢欢, 任国瑞, 顾园村, 王小静. 芜菁中性多糖对PC12细胞氧化损伤保护作用机制的初步研究[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(5): 852-857.
[10]	张若冰, 杨玉赫, 李陈雪, 李文兰. 灵芝多糖药理作用及机制的研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(5): 879-887.
[11]	杨晶莹, 商龙臣, 张驰. 富硒灵芝菌丝多糖、蛋白的提取及其体外抗氧化和抗肿瘤活性研究[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(3): 453-459.
[12]	田磊, 柳春燕, 韩军, 王国栋, . 黄精多糖结构特征及其生物活性研究进展[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(3): 519-530.
[13]	何宝峰, 马新换, 马忠祥, 王宝才, 徐志伟, 马芳兄, 杨天艳, 李荣焜. 基于改进熵权法结合TOPSIS模型和BPNN建模优化甘草多糖醇沉工艺[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(2): 271-280.
[14]	张宽朝, 徐晨阳, 余佳琪, 苏鸿呈, 徐忠有. 牡蒿总黄酮的提取、纯化及抗氧化活性分析[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(2): 281-290.
[15]	陈嘉欣, 邓永平, 李冠龙, 刘晓兰, 肖凯. 鹿茸菇子实体新纤溶酶的高效分离纯化[J]. 天然产物研究与开发, 2023, 35(11): 1947-1955.

雪灵芝多糖的分离纯化及免疫活性评价

Isolation of polysaccharides from Arenaria kansuensis and evaluation of immunological activity

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