籽瓜多糖对H2O2致PC12细胞氧化损伤的保护作用

doi:10.16333/j.1001-6880.2015.02.028

天然产物研究与开发 ›› 2015, Vol. 27 ›› Issue (2): 338-343.doi: 10.16333/j.1001-6880.2015.02.028

籽瓜多糖对H₂O₂致PC12细胞氧化损伤的保护作用

刘琴1,2,3，宋珅1，郭杰1，罗顺3，张继1,2*

1 西北师范大学生命科学学院；2 甘肃特色植物有效成分制品工程技术研究中心；3 甘肃万州健顺生物科技有限公司，兰州 730070

出版日期:2015-02-15 发布日期:2015-02-15

Protective Effects of Polysaccharide from Seed Watermelon on the Oxidative Damage of PC12 Cells Induced by H₂O₂

LIU Qin1,2,3, SONG Shen1, GUO Jie1, LUO Shun3, ZHANG Ji1,2*

1 College of Life Science,Northwest Normal University;2 Research Center For Gansu Distinctive Plants,Northwest Normal University;3Jianshun biosciences corporation,Lanzhou 730070,China

Online:2015-02-15 Published:2015-02-15

摘要/Abstract

摘要： 本文研究了籽瓜多糖（SWP）对H₂O₂致PC12细胞氧化应激损伤的影响及其机制。通过建立H₂O₂诱导PC12细胞氧化损伤模型，CCK-8法测定细胞存活率；硫辛酰胺脱氢酶催化的INT显色反应检测乳酸脱氢酶（LDH）释放量，DCFH-DA检测细胞内ROS；ELISA法检测8-OHdG；JC-1染色检测细胞线粒体膜电位；利用caspase-3可以催化底物Ac-DEVD-pNA的反应检测caspase-3活性；应用caspase-9催化特异性底物Ac-LEHD-pNA检测caspase-9活性。结果显示：过氧化氢组与对照组相比，终浓度为500 μmol/L H₂O₂作用细胞24 h后，细胞活力显著下降（P<0.01）；LDH释放量和细胞内ROS增加（P<0.01）；8-OHdG含量上升（P<0.01）；线粒体膜电位下降（P<0.01）；caspase-3和caspase-9活性增强（P<0.01）。与H₂O₂损伤组相比，不同剂量的SWP预处理后，能显著改善H₂O₂引起的上述指标的变化（P<0.05）。由此得出：SWP对H₂O₂诱导的PC12细胞的氧化损伤具有一定的保护作用。

关键词: 籽瓜多糖, 过氧化氢, 氧化损伤, Caspase, PC12细胞

Abstract: To determine the neuroprotective effects of seed watermelon polysaccharide on PC12 cells injured by H₂O₂ and the molecular mechanisms underlying these neuroprotective effects.The cell viability was analyzed by CCK-8 assay,the toxicity model was established by treating PC12 cells with H₂O₂.The releasing rate of LDH was determined by the color reaction of diaphorase INT.ROS production was determined by DCFH-DA fluorescence.8-OHdG production was determined by ELISA.Mitochondria membrane potential was determined by JC-1 staining.Caspase-3 activity was determined by caspase3 catalyze the substrate specificity Ac-DEVD-pNA.Caspase-9 activity was determined by caspase-9 catalyze the substrate specificity Ac-LEHD-pNA.In comparison to control cells,exposure of cells to 500 μmol/L H₂O₂for 24 h resulted in approximately 65% cell viability of control (P<0.01). H₂O₂induced significantly the increase of LDH release,intracellular ROS and 8-OHdG (P<0.01),and the decrease of mitochondrial membrane potential (P<0.01). H₂O₂ induced oxidative stress increased caspase-3 and caspase-9 activity (P<0.01).Compared with H₂O₂ group,different doses of SWP can significantly improve the change of the index H₂O₂-induced (P<0.05).Polysaccharide from seed watermelon had protective effect on PC12 cells injury induced by H₂O₂ in culture.

Key words: polysaccharide from seed watermelon, hydrogen peroxide, oxidative damage, caspase, PC12 cells

中图分类号:

R285

刘琴1,2,3，宋珅1，郭杰1，罗顺3，张继1,2*. 籽瓜多糖对H₂O₂致PC12细胞氧化损伤的保护作用[J]. 天然产物研究与开发, 2015, 27(2): 338-343.

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籽瓜多糖对H₂O₂致PC12细胞氧化损伤的保护作用

Protective Effects of Polysaccharide from Seed Watermelon on the Oxidative Damage of PC12 Cells Induced by H₂O₂

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