天然产物研究与开发

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1. 九华黄精的化学成分及其抗炎活性研究

张宇, 夏宬涵, 吴江平, 王国栋, 韩军

天然产物研究与开发 2024, 36 (7): 1149-1157. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.7.006

摘要（587）

PDF（pc）（707KB）（396）

研究“十大皖药”品种——九华黄精（Polygonatum cyrtonema Hua in Jiuhua Mountain）块状根茎的化学成分及其抗炎活性。综合采用硅胶柱色谱、MCI柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等方法从九华黄精生药材的85%乙醇提取物中共分离得到16个化合物，并通过¹H NMR、¹³C NMR、HR-ESI-MS技术鉴定了化合物结构，分别为polygodoside H（1）、polygonatumoside G（2）、25(S)-funkioside B（3）、typaspidoside A（4）、芦丁（5）、木犀草素-7-O-芸香糖苷（6）、山柰酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷（9）、落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷（10）、5-O-咖啡酰奎宁酸甲酯（11）、4-O-咖啡酰奎宁酸甲酯（12）、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯（13）、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（14）、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（15）、对羟基肉桂酸甲酯（16），所有化合物均是首次从九华黄精中分离得到。活性筛选结果显示化合物1~3、5~8均能够有效抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO，且无细胞毒作用，IC₅₀值范围为8.28~41.85 μmol/L，表现出一定程度的抗炎活性。

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2. 一株类芽孢杆菌的鉴定及抗菌活性探究

陈利, 黄升, 苏国旗, 杨飞云, 黄金秀, 齐仁立, 刘作华

天然产物研究与开发 2024, 36 (9): 1499-1511. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.9.005

摘要（557）

PDF（pc）（1588KB）（385）

为了筛选产新型天然抗菌物质微生物，本研究利用共培养的方法筛选目的菌株；通过16S rDNA、生理生化性质和全基因组测序鉴定菌株种属；利用抗菌物质稳定性、菌株基因组次级代谢产物预测和最小抑菌浓度研究抗菌物质的生物学特性。从土壤中筛选了一株类芽孢杆菌Paenibacillus elgii CL-1，该菌所产抗菌物质具有广谱抗菌性能，且耐受过氧化氢酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K和酸碱，高温不稳定；利用antiSMASH分析发现Paenibacillus elgii CL-1含有penisin和octapeptin C4等17种次级代谢产物基因簇；进一步的分析发现，通过高效液相色谱从该菌发酵液中分离纯化出的抗菌物质抗菌谱广，抗菌活性好，最小抑菌浓度值可达1 μg/mL。通过质谱分析发现类芽孢杆菌Paenibacillus elgii CL-1能够产生抗菌谱广、稳定性好和抗菌活性强的抗菌物质pelgipeptin B。本研究为挖掘天然抗菌药物pelgipeptin B提供底盘菌株，为其研发和应用奠定基础。

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3. 基于网络药理学探讨臭灵丹抗炎的作用机制

周永芝, 舒腾云, 宋玉莹, 郑立雄, 李海舟

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1420-1431. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.016

摘要（494）

PDF（pc）（2521KB）（24）

基于LC-MS和网络药理学对臭灵丹乙酸乙酯部位（ethyl acetate fraction of Laggerae Herba，ELH）进行成分和靶点通路分析，并通过LPS（lipopolysaccharides，LPS）诱导RAW 264.7炎症模型探讨ELH抗炎的作用机制。通过Griess实验，比较臭灵丹不同萃取部位的抗炎活性；利用LC-MS对ELH的化学成分进行分析；基于网络药理学预测和筛选ELH发挥抗炎的核心成分，靶基因和主要通路，并用分子对接和蛋白免疫印迹（Western blot）对靶点和通路进行验证。Griess实验结果表明，ELH可显著抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO，抑制率达103.07%，是臭灵丹发挥抗炎作用的活性部位；LC-MS分析得到ELH中23个化学成分，包括21个倍半萜，1个黄酮，1个有机酸体；基于4个数据库，获得66个共同靶点；蛋白互作网络（protein-protein interaction，PPI）分析发现获得白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）等degree值大于40的6个核心靶点；GO、KEGG富集分析发现，核心靶点可能通过PI3K-Akt、IL-17、NF-κB和TNF等信号通路发挥抗炎作用；分子对接结果显示23个化学成分与核心靶点具有良好的结合能力；Western blot实验结果显示ELH处理后Akt的磷酸化水平和NF-κB表达显著下降（P<0.05）。综上，ELH能抑制AKT磷酸化，在一定程度上抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞中NF-κB信号通路的激活，从而发挥抗炎作用。

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4. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS联和GNPS技术对凤凰雪茶的化学成分分析

吴娟, 龚友兰, 滕建裕, 王雅静, 冯敏, 周思倩, 龙红萍

天然产物研究与开发 2024, 36 (9): 1484-1498. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.9.004

摘要（482）

PDF（pc）（2239KB）（415）

凤凰雪茶是一种药食两用植物，具有较大的应用开发价值，本研究拟采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱技术（ultra performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight tandem mass spectrometry，UPLC-Q-TOF-MS/MS）联和全球天然产物交互分子网络（global natural products social molecular networking，GNPS）技术对凤凰雪茶的化学成分进行快速分析鉴定。在正、负离子模式下采集质谱数据，通过软件分析、数据库匹配、对照品比对等鉴别出相应化合物，并根据MS/MS碎片的相似性创建分子网络。从凤凰雪茶中共鉴定出58个化学成分，主要包括33个黄酮类、11个酚类、4个生物碱类、3个三萜类和其他类化合物。原儿茶酸-4-葡萄糖苷、杨梅素-3-芸香糖苷、积雪草酸等32个化合物首次在葡萄科蛇葡萄属得到鉴定，并进一步探讨了各类别化合物的质谱裂解规律以及黄酮类网络节点的关联分析。本研究运用液质联用结合GNPS技术可以快速实现对凤凰雪茶的成分的系统性分析，为其探究临床应用、质量控制及药效物质基础提供参考。

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5. 杏叶防风的化学成分及抗炎活性研究（Ⅱ）

汪洋, 薛靖怡, 雷艳, 潘洁, 杨畅, 李勇军, 马雪

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1357-1367. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.009

摘要（461）

PDF（pc）（1075KB）（408）

为了研究杏叶防风（Pimpinella candolleana）的化学成分及其抗炎活性，采用正相硅胶、ODS反相硅胶、D101大孔吸附树脂及MCI树脂等多种色谱方法对杏叶防风70%乙醇提取物部位进行了分离，并通过与文献对比波谱数据鉴定化合物结构。体外培养小鼠单核巨噬细胞白血病细胞（RAW 264.7）细胞，脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导RAW 264.7细胞建立氧化损伤模型，利用一氧化氮（NO）试剂盒检测NO浓度，评价各化合物的抗炎活性。从该植物中分离得到25个黄酮类化合物，分别鉴定为1-hydroxy-2,3,4,7-tetramethoxyxanthone（1）、1-hydroxy-2,3,4,6-tetramethoxyxanthone（2）、bellidifolin（3）、desmethylbellidifolin（4）、当药醇苷（5）、日本当药黄素（6）、异日本獐牙菜素（7）、木犀草素-7-O-β-D-芸香糖苷（8）、luteolin-7-O-β-D-glucopyranosyl-（1→6）-［6′′′-O-caffeoyl］-β-D-glucopyranoside（9）、木犀草素-4′-O-β-D-葡萄糖苷（10）、木犀草素-6-C-β-L-岩藻糖苷（11）、荭草素（12）、异荭草素（13）、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷（14）、芹菜素（15）、quercetin-3-O-β-D-（6″-caffeoylgalactoside）（16）、小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷（17）、葛根素（18）、牡荆素（19）、商陆素-3-O-β-D-葡萄糖苷（20）、商陆素-3-O-β-D-半乳糖苷（21）、鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷（22）、鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷（23）、异鼠李素-3O-β-D-葡萄糖苷（24）、柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖苷（25）。其中，化合物13~15首次从杏叶防风中分离得到，化合物1~12、16~25首次从茴芹属植物中分离得到；生物活性测定结果表明，化合物1~3、6~10、12~15、17~20、23、25能抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞的NO释放，显示出一定的抗炎活性。

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6. 铁皮石斛花多糖的结构组成及免疫活性研究

王新婷, 王珂, 张志远, 刘鑫澜, 向泽敏, 袁文娟

天然产物研究与开发 2024, 36 (12): 1999-2007. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.12.001

摘要（452）

PDF（pc）（1502KB）（167）

从铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura & Migo）花中分离纯化多糖组分，初步分析其结构特征并从细胞水平研究其免疫调节作用，为铁皮石斛花多糖的工业化生产与应用提供理论依据和方法参考。本文以铁皮石斛干花为原料，采用水提醇沉得到粗多糖，通过DEAE-52纤维素柱和SephadexG-100凝胶柱层析技术分离纯化得到铁皮石斛花多糖，采用高效凝胶渗透色谱法、PMP柱前衍生化法、傅里叶红外光谱、紫外吸收光谱等方法对铁皮石斛花多糖进行结构组成鉴定，并测定其免疫调节活性。结果表明，经过分离提纯得到的铁皮石斛花多糖，得率为0.578%，通过与单糖对照品进行比较，其主要由甘露糖、葡萄糖、微量半乳糖、木糖、阿拉伯糖组成（74.388∶22.676∶2.171∶0.173∶0.592），平均分子量为2 216 Da。在50~200 μg/mL范围内，铁皮石斛花多糖可显著增强巨噬细胞吞噬活性，有效刺激细胞释放NO，促进活性氧的产生。研究表明，铁皮石斛花多糖含量丰富，且具有较强的免疫调节活性，其发挥免疫作用可能是通过TLR4/NF-κB信号通路起作用。

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7. 连翘叶总黄酮对斑马鱼溃疡性结肠炎的作用研究

吕允珂, 郑萱, 张菊, 崔施展, 王明雪, 周春伶, 贾东升

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1279-1287. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.001

摘要（431）

PDF（pc）（1736KB）（33）

研究连翘叶总黄酮（Forsythia suspensa leaf total flavonoid，FSLF）对2，4，6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzene sulfonicacid，TNBS）诱导斑马鱼溃疡性结肠炎的疗效作用。采用D101大孔树脂对FSLF分离纯化并使用超高效液相色谱-质谱联用仪（UPLC-MS）分析成分；将36条野生斑马鱼分为空白组、模型组、FSLF低、中、高剂量给药组（10、20、40 μg/mL）、地塞米松组（50 μg/mL），除空白组外，其余各组均用160 mmol/L TNBS肛门注射诱导斑马鱼溃疡性结肠炎模型，使用苏木素-伊红、阿利新蓝染色法观察斑马鱼结肠组织病理和杯状细胞数量变化，通过试剂盒检测斑马鱼结肠组织活性氧（reactive oxygen species，ROS）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）含量和活性变化，经荧光定量PCR法检测斑马鱼结肠组织中髓样分化因子88（mycloid differentiation factor 88，MyD88）、肿瘤坏死因子相关分子6（TNF receptor associated factor 6，TRAF6）、核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）p65、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）mRNA表达量。结果显示，FSLF 30%乙醇洗脱部位总黄酮含量最高，UPLC-MS共鉴定出芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷、金丝桃苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、橙皮苷、山柰酚、紫云英苷9种黄酮类化学成分。与模型组相比FSLF可改善斑马鱼结肠组织结构，提高杯状细胞数量（P＜0.001）,降低ROS含量（P＜0.05）和MyD88/TRAF6/NF-κBp65、TNF-α、IL-1β mRNA表达量,升高SOD活性（P＜0.01）和IL-10 mRNA表达量（P＜0.05）。本研究表明FSLF对斑马鱼溃疡性结肠炎有明显治疗作用，其作用机制可能与通过调节信号通路NF-κB，下调炎性因子TNF-α、IL-1β和上调IL-10 mRNA表达量有关。

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8. 不同道地产区黄芩的主要成分和抗氧化活性的比较研究

刘雨然, 郭梦佳, 杨立新, 瞿燕, 潘晓丽, 杨滨, 李化

天然产物研究与开发 2024, 36 (6): 919-929. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.6.001

摘要（427）

PDF（pc）（1616KB）（28）

探究山东莱芜与河北承德两个道地产区黄芩的黄酮特征指纹图谱及其抗氧化能力的谱-效关系。在构建黄芩超高效液相色谱（ultra-performance liquid chromatography，UPLC）指纹图谱的基础上，采用体外抗氧化法测定25批不同道地产区黄芩对DPPH、ABTS、O₂^-自由基的清除能力，计算其半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC₅₀）；运用正交偏最小二乘判别（orthogonal partial least-squares discrimination analysis，OPLS-DA）法和双变量相关性分析构建化学成分和抗氧化活性的谱-效关系。25批样品的指纹图谱相似度均大于0.983，确定了16个共有峰，采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用法（ultra-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry，UPLC-Q-TOF-MS）确认了12个化合物。两个道地产区的黄芩均具有较强的清除DPPH、ABTS和O₂^-自由基能力，其中山东莱芜黄芩的抗氧化能力优于河北承德黄芩。OPLS-DA所建的两个模型，均可成功区分两个道地产区的黄芩，且黄芩苷、黄芩素和千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷是二者的差异性标志成分。谱效分析发现，黄芩药材中黄酮类成分相互间可能对DPPH、ABTS、O₂^-自由基的清除能力具有协同增效作用。本研究建立了基于化学成分和抗氧化活性的黄芩谱效评价模式，可用于不同道地产区黄芩品质的评价，可为中药材的道地性研究提供帮助。

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9. 益生菌发酵黄芪对LPS诱导的人正常结肠上皮细胞NCM-460氧化损伤保护作用的机制研究

王萍, 王长福, 韩士林, 匡海学, 王秋红

天然产物研究与开发 2024, 36 (9): 1464-1471. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.9.002

摘要（423）

PDF（pc）（1230KB）（20）

探究益生菌发酵黄芪（fermented Astragali Radix，F-As）与黄芪（Astragali Radix，As）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的肠道细胞NCM-460氧化损伤的保护作用及其分子机制。利用MTT法确定了LPS、As和F-As的工作浓度；分别检测并比较了LPS组、As + LPS组和F-As + LPS组，细胞中氧化应激相关指标、抗氧化相关基因在转录水平和蛋白水平表达的变化。与Con组相比，LPS组的活性氧（reactive oxygen species，ROS）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）增加（P<0.01），而细胞的存活率、谷胱甘肽（glutathione，GSH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）以及细胞中的抗氧化基因在转录水平和蛋白水平均显著降低（P<0.01）；而As + LPS组和F-As + LPS组，细胞中的ROS和MDA水平降低（P<0.01），细胞的存活率GSH、SOD、T-AOC以及抗氧化基因在转录和蛋白水平得到恢复（P<0.01），且与As + LPS组相比，F-As + LPS组恢复得更显著（P<0.05）。研究结果提示，As和F-As均可以通过激活抗氧化基因的表达，清除细胞内过多的ROS和MDA，从而对LPS诱导的细胞氧化损伤起到保护作用，且F-As优于As。

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10. 油橄榄叶提取物对HaCaT细胞氧化损伤的保护作用及抑菌活性

丁亚男, 王瑞阳, 高观祯, 汪惠勤, 周建武, 饶平凡

天然产物研究与开发 2024, 36 (9): 1584-1591. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.9.014

摘要（419）

PDF（pc）（1280KB）（18）

为研究油橄榄叶提取物对人永生化角质形成细胞（HaCaT）氧化损伤的保护作用及抑菌作用，采用肌红蛋白保护率评价油橄榄叶提取物对不同种类自由基的胞外抗氧化能力，建立HaCaT细胞的氧化损伤和炎症模型，评价油橄榄叶提取物对细胞氧化损伤的保护作用，并进一步考察油橄榄叶提取物对常见病原菌的抑制作用。结果表明油橄榄叶提取物对羟基自由基、次氯酸根和过氧自由基均具有抗氧化作用，其中对羟基自由基和过氧自由基的抗氧化效果较好。在细胞水平上，油橄榄叶提取物能够显著降低HaCaT的胞内自由基，可以有效改善HaCaT细胞的氧化应激状态。同时，0.156~0.625 μg/mL的油橄榄叶提取物能够有效降低炎症细胞中的白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）和白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）因子水平，0.156~0.312 μg/mL的提取物能够降低肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平。此外，油橄榄叶提取物能够有效抑制金黄色葡萄球菌，而对大肠杆菌和铜绿假单胞菌敏感度低。综上，油橄榄叶提取物对HaCaT细胞的氧化损伤具有一定的保护作用，且具有抗炎效果和抑菌活性。

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11. 雪层杜鹃中的黄酮类化合物及其抗氧化和抗炎活性研究

王兰, 曾禧, 姚后宗, 袁涛

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1350-1356. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.008

摘要（411）

PDF（pc）（635KB）（29）

本文研究雪层杜鹃提取物中的黄酮类化学成分及其抗氧化和抗炎活性。本研究采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱（HPLC）等多种色谱分离技术对雪层杜鹃的乙酸乙酯提取物进行分离纯化，并通过NMR、IR和HR-ESI-MS等方法共鉴定出8个黄酮类化合物，包括1个新化合物：3′,8-二甲氧基槲皮-3-O-α-L-阿拉伯呋喃糖苷（1）和7个已知化合物：桑黄素-3-O-β-L-赖氧苷（2）、花旗松素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷（3）、表儿茶素（4）、(–)-表没食子儿茶素（5）、(–)-儿茶素（6）、二氢杨梅素（7）、二氢槲皮素（8）。它们的抗氧化和抗炎活性利用H₂O₂氧化损伤模型和脂多糖诱导的一氧化氮生成模型分别测定。化合物2、4和8使H₂O₂损伤的SH-SY5Y细胞存活率从（44.0±2.3）%分别提高到了（80.6±0.4）%、（78.4±1.6）%和（81.9±1.7）%。化合物8也表现出一定的抗炎活性，IC₅₀值为37.7 μmol/L。结果证明雪层杜鹃中的黄酮类化合物具有被发掘成抗氧化和抗炎先导化合物的潜力。

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12. 基于网络药理学及实验验证探究苗药虎掌草不同溶剂提取物抗前列腺癌活性及其作用机制

黄丽荣, 余佳, 李娇, 程莎骆衡

天然产物研究与开发 2024, 36 (7): 1231-1241. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.7.016

摘要（404）

PDF（pc）（2028KB）（18）

运用网络药理学预测结合实验验证研究苗药虎掌草不同溶剂提取物的抗前列腺癌活性及其作用机制。分别以水、75%乙醇和乙酸乙酯提取虎掌草获得粗提物，通过MTT法体外检测3种溶剂提取物对前列腺癌细胞PC3增殖的影响，流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响，评价提取物对PC3细胞的抑制作用；采用GC-MS分析乙酸乙酯提取物的化学成分；运用网络药理学分析虎掌草的活性成分及抗前列腺癌作用靶点，构建PPI网络，拓扑分析筛选核心靶点，通过GO生物功能富集和KEGG通路富集分析构建虎掌草抗前列腺癌的信号通路，预测潜在作用机制；利用RT-PCR检测虎掌草提取物对预测的TNF信号通路相关基因转录水平表达的影响，验证预测靶点，进一步分析作用机制。细胞实验表明，3种溶剂提取物对PC3细胞均具有较强的抑制增殖作用，且能显著诱导细胞凋亡（P<0.01）；GC-MS和网络药理学结果表明白桦脂酸和虎掌草皂苷D为提取物的主要药效成分，检索得到与抗前列腺癌相关的靶点89个，进一步筛选得到核心靶点15个，涉及ALB、JUN、HSP90AA1等靶点；GO功能富集涉及142个生物过程、28个细胞组成和41个分子功能，KEGG通路富集分析交集靶点主要涉及TNF、TRP、NF-κB、癌症通路等。RT-PCR靶点验证实验表明3种溶剂提取物均能显著影响TNF信号通路关键基因的表达，证明了网络药理学预测机制的可靠性。本研究揭示了虎掌草水、75%乙醇和乙酸乙酯提取物具有较强的抗前列腺癌活性，白桦脂酸和虎掌草皂苷D为主要药效成分，其作用机制可能与调控TNF、TRP、NF-κB、癌症通路等有关。

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13. 幽门螺杆菌相关性胃炎关键基因的筛选及潜在治疗中药预测

易柳凤, 陶思羽, 李萌, 王少丽, 刘震

天然产物研究与开发 2024, 36 (7): 1200-1206. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.7.012

摘要（387）

PDF（pc）（1794KB）（21）

基于生物信息学筛选幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）相关性胃炎的关键基因、分析通路机制、预测潜在治疗中药。首先从GEO数据库获取GSE60427与GSE60662数据集，借助R软件筛选出差异表达基因并进行富集分析，通过STRING数据库和Cytoscape软件进一步筛选出关键基因，利用UALCAN数据库、GEPIA数据库对关键基因进行表达验证，在Coremine Medical数据库预测筛选潜在中药。最后筛选出344个差异表达基因，与白细胞粘附、T细胞活化、免疫反应、趋化因子受体结合等生物功能有关，通过Th17细胞分化、Th1和Th2细胞分化等信号通路。得到的10个关键基因是PTPRC、TNF、ITGB2、FCGR3A、CD19、LCK、LCP2、CD48、CTLA4、IL7R。结合中医“毒邪”理论，将预测的潜在中药分为健脾解毒、化湿解毒、活血解毒、清热解毒四大类，可为治疗Hp相关性胃炎，抑制“炎-癌”转化，防治胃癌提供思路。

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14. 基于UPLC-QE Plus-MS/MS技术的广东紫珠化学成分分析及其神经保护活性

刘永林, 许熙, 汤圆, 曾聪, 胡培, 陈杰, 李诒光

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1639-1659. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.001

摘要（387）

PDF（pc）（2848KB）（20）

分析广东紫珠（Callicarpa kwangtungensis，CK）的化学成分并探讨其对神经细胞的保护作用。本研究采用超高效液相色谱串联四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-QE Plus-MS/MS）对CK的化学成分进行鉴定。通过建立体外神经炎症模型，检测一氧化氮（nitric oxide，NO）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）炎症因子含量，结合细胞流式术检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，并使用免疫荧光观察细胞形态变化，以评估CK的神经保护作用。在CK中共鉴定出108个化学成分，包括34个苯乙醇苷类、10个苯丙素类、25个黄酮类、23个萜类、10个有机酸类、2个有机醛类和4个其他类化合物，其中21个成分为首次鉴定。体外实验结果表明，CK能够抑制脂多糖诱导的BV2细胞NO、IL-1β、IL-6和ROS的表达水平，并能够逆转BV2细胞的活化状态。本研究通过UPLC-QE Plus-MS/MS实现对CK化学成分进行快速分析，并探讨了其神经保护活性，为后续的药效物质基础研究和新药开发提供了重要的理论依据。

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15. 组学技术在黄芪质量评价及药理作用机制研究中的应用

陆国弟, 侯嘉, 强正泽, 杨扶德

天然产物研究与开发 2024, 36 (7): 1257-1265. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.7.018

摘要（380）

PDF（pc）（1402KB）（12）

黄芪为补气之要药，临床应用广泛。但因各种因素导致黄芪质量参差不齐现象突出，且现行评价方法难以从整体上把控黄芪药材的质量优劣，未能有效的与不同复方中黄芪功效定向关联，严重影响其临床疗效及安全用药。针对上述问题，探索具有整体性和系统性特点的组学技术在中药材黄芪质量优劣性评价中的应用迫在眉睫。鉴于此本文查阅近年文献，对组学（代谢组学、转录组学、基因组学、蛋白组学）技术应用于中药材黄芪质量控制（品种、产地、种植方式、逆境、炮制加工）以及药理作用（抗疲劳、抗心衰、防治内分泌疾病、抗肿瘤）机制方面的研究进行综述，提出未来研究的方向与趋势，旨在为临床合理用药建立其全面系统的质量评价体系提供新的思路及方法。

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16. 海藻糖药理作用研究进展

邱尉宸, 恽奕轩, 蒋小岗

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1813-1819. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.017

摘要（364）

PDF（pc）（949KB）（14）

海藻糖（trehalose）是一种天然存在的二糖类物质，其以多种形式广泛存在于自然界中。由于海藻糖在细胞保护、应激耐受等方面的特殊作用，其研究及应用前景备受关注。本文总结了近年来对海藻糖药理作用及其作用机制研究的进展，以期为海藻糖的临床应用提供理论线索。

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17. 和田玫瑰精油提取工艺优化及其抗氧化和美白活性研究

古丽菲热·伊力哈木, 阿塔吾拉·铁木尔, 伊力塔尔·穆哈塔尔, 萨拉麦提·艾迪热斯

天然产物研究与开发 2024, 36 (11): 1855-1862. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.11.005

摘要（364）

PDF（pc）（1216KB）（21）

探究和田玫瑰精油的最佳提取工艺以及其抗氧化和美白活性。以和田玫瑰为原料，采用盐浸辅助水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油，研究盐浸浸泡时间、NaCl质量浓度和料液比对精油提取量的影响，在单因素试验的基础上采用Box-Behnken响应面法优化提取工艺参数，最优提取条件得到的和田玫瑰精油进行体外和细胞水平实验来验证其抗氧化和美白活性。结果表明：在盐浸浸泡时间为2.5 h，NaCl质量浓度为5.4%，料液比1∶7.3（g/mL）条件下精油提取量最高，可达到23.35 mg/g（干花）。在此条件下得到的玫瑰精油对DPPH自由基清除能力的IC₅₀值为7.14 mg/mL；细胞实验结果表明，和田玫瑰精油能降低α-MSH诱导后B16F10细胞中的黑色素含量，抑制细胞水平上酪氨酸酶的活性。本研究提供了一种高效提取和田玫瑰精油的方法，证明了和田玫瑰精油具有一定的抗氧化和美白活性，为和田玫瑰精深加工以及抗氧化美白应用方面提供了科学依据。

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18. 丹参多糖对碘乙酸钠所致大鼠膝骨性关节炎的治疗作用及机制研究

张扬, 张宁, 玄锋学, 王博, 于海涛, 郭梓恒, 李高峰

天然产物研究与开发 2024, 36 (11): 1821-1829. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.11.001

摘要（358）

PDF（pc）（1182KB）（22）

探讨丹参多糖对碘乙酸钠所致大鼠膝骨性关节炎（knee osteoarthritis，KOA）的治疗作用及潜在机制。采用膝关节腔内注射碘乙酸钠法建立大鼠KOA模型，分为模型组、丹参多糖低、高剂量组（40、80 mg/kg）及塞来昔布组（20 mg/kg），另选取12只大鼠作为假手术组，持续干预4周后检测相关指标变化情况。结果发现，与模型组比较，丹参多糖低、高剂量组大鼠爪压评分及步态评分明显下降（P<0.05，P<0.01）,机械性缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold，MWT）及热缩足反射潜伏期（thermal withdrawal latency， TWL）明显增加（P<0.01），关节软骨组织病理形态减轻，Markin评分明显降低（P<0.05，P<0.01）；血清软骨寡聚基质蛋白（cartilage oligomeric matrix protein，COMP）、血清Ⅰ型胶原C末端肽（C-terminal peptide of type I collagen，CTX-Ⅰ）含量及关节软骨组织半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（B-lymphoblastoma-2，Bcl-2）相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）mRNA表达明显下降（P<0.05，P<0.01），骨钙素（osteocalcin，OCN）含量及关节软骨组织Bcl-2 mRNA表达明显升高（P<0.05，P<0.01），关节滑液中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6含量及关节软骨组织磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（phosphorylated mitogen-activated protein kinase p38，p-p38 MAPK）、磷酸化核因子-κB p65（phosphorylated nuclear factor-κB p65，p-NF-κB p65）蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）。研究结果表明，丹参多糖对碘乙酸钠所致大鼠KOA具有治疗作用，其机制与改善骨代谢、抗凋亡及抑制MAPK/NF-κB信号通路介导的炎症反应有关。

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19. 常山胡柚果皮精油提取工艺模型筛选优化、化学成分及抗氧化活性研究

江丽洁, 温乐乐, 石佳艺, 邓雅慧, 刘巨钊, 袁强, 崔琦

天然产物研究与开发 2024, 36 (7): 1101-1111. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.7.001

摘要（356）

PDF（pc）（1508KB）（42）

研究常山胡柚果皮（Citrus × aurantium Changshan-huyou pericarp，CP）精油化学成分，并对提取条件进行优化。采用水蒸气蒸馏法提取CP精油，利用气相色谱-质谱法进行分析，通过单因素试验考察不同提取条件对提取率的影响，并利用响应面、人工神经网络进行工艺优化。结果表明，CP精油中主要成分为D-柠檬烯；最佳工艺条件：粒径24目、蒸馏水浸泡1 h、液固比34.86 mL/g、提取温度300.00 ℃、提取时间166.21 min，在此条件下，CP精油提取率为0.82%，响应面与人工神经网络相结合，可有效地利用已有数据对目标寻优。同时CP精油对DPPH自由基有明显的清除作用（IC₅₀值为65.01 mg/mL），表明CP精油具有一定的抗氧化活性。

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20. 植物多酚对核桃青皮色素染发性能的影响

丛君钊, 苗齐, 徐怀德, 翟梅枝, 王军, 罗安伟, 李梅

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1777-1786. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.014

摘要（352）

PDF（pc）（2579KB）（12）

核桃青皮色素作为一种天然植物染料，着色力差，应用受限。本文选用六种天然植物多酚（没食子酸、单宁酸、阿魏酸、绿原酸、鞣花酸和儿茶素），研究其对核桃青皮色素染发性能的影响。在此基础上，以核桃青皮色素主要呈色物质胡桃醌为研究对象，探究有助染性的多酚与胡桃醌协同染发时的动力学模型，并通过分子对接技术阐明胡桃醌、多酚和人发角蛋白三者间的相互作用。结果表明：没食子酸、单宁酸、阿魏酸和绿原酸对核桃青皮色素染发有助染性，并能提高染发色牢度，且不会对头发毛鳞片结构造成破坏；与核桃青皮色素单独染发相比，四种多酚协同核桃青皮色素染发后，头发的抗紫外线性能和断裂强度有所下降，但仍高于未染头发。胡桃醌在头发上的吸附过程不符合动力学模型，加入没食子酸、单宁酸和阿魏酸后符合准二级动力学模型。此外，绿原酸加入后使分子间结合能力增强，单宁酸加入后分子间结合能力变弱，没食子酸、阿魏酸和绿原酸的加入增加了分子间氢键总数。该研究可为天然核桃青皮染发剂的开发提供理论参考。

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21. 芍药花提取物中黄酮的测定及其体外抗氧化和降脂活性研究

竹娟, 王译晗, 陈立莉, 曲文鑫, 刘荣

天然产物研究与开发 2024, 36 (11): 1838-1844. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.11.003

摘要（346）

PDF（pc）（962KB）（17）

对芍药花不同溶剂提取物中黄酮含量、体外抗氧化活性以及降脂活性进行对比研究。本文采用NaNO₂-Al(NO₃)₃显色法测定黄酮含量，以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和总还原能力为考察指标评价芍药花提取物的抗氧化能力，以抑制胰脂肪酶能力、结合胆酸盐能力及胆固醇吸附能力为考察指标评价芍药花提取物的降脂活性。结果表明：低共熔溶剂提取物总黄酮含量高于乙醇提取物总黄酮含量，同时低共熔溶剂提取法也提高了芍药花提取物的抗氧化活性和降脂活性，低共熔溶剂提取物对ABTS自由基清除的IC50值为0.256 mg/mL，对DPPH自由基清除的IC₅₀值为0.296 mg/mL；对胰脂肪酶半数抑制浓度为0.788 mg/mL，对胆酸钠、牛磺胆酸钠和甘氨酸钠结合的IC50值分别为0.883、0.841、0.850 mg/mL，在芍药花粗提物用量为0.5 g时，对胆固醇吸附量最大为6.28 mg/g。因此低共熔溶剂可作为提取芍药花中抗氧化和降脂成分的适宜提取溶剂，提取物具有较好的抗氧化和降脂潜力，为芍药花后续高价值化利用提供理论基础。

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22. 基于广泛靶向代谢组学分析香樟不同部位挥发性次生代谢产物差异

雷金梅, 江冰冰, 杨芳, 郭存武, 夏宇薪, 邓秀娟, 刘晓慧, 王白娟

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1679-1691. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.004

摘要（336）

PDF（pc）（1724KB）（18）

香樟是宝贵的芳香植物资源，研究香樟不同部位的挥发性成分可为进一步提取和筛选香樟天然活性物质提供依据。本研究以香樟的鲜叶和鲜果为材料，利用顶空固相微萃取-气质联用技术（HS-SPME-GC-MS）进行广泛靶向代谢组学分析。叶片和果实共检测出1 158种次生代谢产物，包括萜类、酯、杂环化合物、烃类、酮、醛等16类，其中萜类、酯和杂环化合物三类次生代谢产物占比最高。通过PCA和聚类分析发现，叶片与果实相比，存在141种差异代谢产物上调和417种下调。KEGG富集分析发现，叶片与果实的差异代谢物主要涉及倍半萜类和三萜类生物合成、单萜类生物合成、苯丙烷类生物合成等途径。萜类在叶片的相对含量占比达到92.33%，果实中的相对含量占比达到82.73%，是香樟中主要的挥发性成分，也是重要的药理活性物质。研究结果表明香樟叶片和果实挥发性次生代谢物的种类和含量差异较大，本研究可为香樟叶片和果实资源的精细开发和利用提供理论依据。

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23. 不同产地佩兰多成分定量分析及质量差异性评价研究

卢立欣, 郑磊, 李志明, 宋超

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1409-1419. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.015

摘要（334）

PDF（pc）（1266KB）（13）

建立不同产地佩兰药材中11个成分含量同步检测方法，并采用化学识别模式和灰色关联度分析（grey relational analysis，GRA）法对其质量差异性进行评价。收集8省18个批次佩兰样品，采用高效液相色谱法同时检测佩兰中芦丁、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、木犀草素、槲皮素、蒲公英甾醇、β-谷甾醇、豆甾醇、延胡索酸、琥珀酸、1,2-苯并吡喃酮和泽兰内酯含量，建立佩兰多组分定量控制模式；采用化学识别模式和GRA法建立佩兰质量优劣评价模型，对其质量进行差异性评价。在构建的色谱条件下，外标法方法学验证符合《中华人民共和国药典》规定；一测多评法（quantitative analysis of multicomponents by single-marker，QAMS）与外标法检测结果基本无差异；化学识别模式结果提示18批样品聚为3类，芦丁、豆甾醇、木犀草素、槲皮素、1,2-苯并吡喃酮和β-谷甾醇可能是影响佩兰产品质量主要潜在标志物；GRA结果显示18批佩兰质量相对关联度分别为0.418 5、0.477 9、0.544 6、0.503 5、0.509 9、0.544 0、0.486 8、0.338 8、0.354 8、0.360 8、0.329 8、0.291 0、0.618 6、0.627 3、0.644 7、0.662 7、0.546 2和0.570 5，表明江苏、河北和山东产地佩兰整体质量较好。建立的同时测定佩兰中11种成分含量的QAMS法，操作便捷，结果准确；化学识别模式及GRA法客观全面，可用于不同产地佩兰的质量差异评价。

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24. 半夏乙酸乙酯部位化学成分及抗炎活性研究

谢安琪, 池军, 张伟进, 王智民, 代丽萍

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1339-1349. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.007

摘要（334）

PDF（pc）（832KB）（28）

研究半夏（Pinelliae Rhizoma）的化学成分及其抗炎活性。采用硅胶、MCI、ODS、Toyopearl HW-40C柱色谱及半制备液相等方法对半夏乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化，根据理化性质结合现代波谱技术鉴定化合物结构。从中共分离鉴定了26个化合物，分别为环-(L-脯-8-羟基-D-异亮)二肽（1）、环-(L-脯-L-亮)二肽（2）、环-(L-脯-L-苯丙)二肽（3）、环-(L-脯-L-缬)二肽（4）、腺苷（5）、5′-硫甲基-5′-硫代腺（6）、2′-O-甲基腺苷（7）、腺嘌呤（8）、1,8,15-三氮杂环二十一烷-2,9,16-三酮（9）、1,8,15,22-四氮杂环二十八烷-2,9,16,23-四酮（10）、1,8,15,22,29-五氮杂环三十五烷-2,9,16,23,30-五酮（11）、壬二酸二甘油酯（12）、棕榈酸单甘油酯（13）、亚油酸甘油酯（14）、9,12-十八烷二烯基N-羟乙基（15）、亚麻酸2-丁氧基乙酯（16）、(2S)-1-O-(9Z,12Z-十八烷二烯基)-3-O-β-半乳糖基甘油（17）、胡萝卜苷-6′-O-棕榈酸酯（18）、邻苯二甲酸二-(2-乙基)-己酯（19）、落叶松脂素（20）、落叶松脂醇-9-O-β-吡喃葡萄糖苷（21）、(+)-表松脂素-4′-O-β-吡喃葡萄糖苷（22）、(+)-异落叶松脂素-9′-O-β-吡喃葡萄糖苷（23）、(+)-异落叶松脂素-9-O-β-吡喃葡萄糖苷（24）、香草酸（25）、对羟基肉桂醇（26）。其中，化合物1、3、4、8~12、15、16、19、22和23为首次从半夏中分离得到。采用脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞（RAW 264.7）模型对部分单体化合物进行抗炎活性筛选。结果显示，化合物2、3、11、16和21具有抑制NO释放作用，其中化合物16的NO抑制作用较强，其IC₅₀值为10.47 ± 0.89 μmol/L。

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25. 茯苓多糖对糖尿病小鼠糖脂代谢和氧化应激紊乱的影响

张淑静, 宁真真

天然产物研究与开发 2025, 37 (2): 195-203. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2025.2.001

摘要（326）

PDF（pc）（1464KB）（32）

研究茯苓多糖(Poria cocos polysaccharides，PCP)对C57BL/6J小鼠糖尿病模型中糖脂代谢和氧化应激的改善作用及其机制。通过喂食高脂肪食物结合链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)注射诱导2型糖尿病(diabetes mellitus type 2，T2DM)模型，将小鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组、低剂量PCP组(50 mg/kg)、高剂量PCP组(100 mg/kg)和罗格列酮组(RSG)。各组小鼠接受相应处理，连续灌胃6周后，检测血糖、胰岛素、肝糖原、肌糖原、血脂、氧化应激指标等水平。蛋白质印迹分析葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2，GLUT2)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)蛋白水平。通过尾静脉注射编码GLUT2 shRNA的腺病毒载体(Ad-GLUT2 shRNA)探究GLUT2在PCP调控糖脂代谢和氧化应激中的作用。结果显示，PCP显著改善了小鼠的葡萄糖耐量和胰岛素耐量，降低了空腹血糖和胰岛素水平，并提高了肝糖原和肌糖原水平，表明PCP具有抗高血糖作用。同时，PCP显著降低了小鼠的体重、肝组织、附睾脂肪和皮下脂肪重量，并改善了血脂水平，包括降低总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglycerides，TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)和游离脂肪酸(free fatty acids，FFA)水平，提高高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)水平。此外，PCP还通过增强超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性，减少活性氧(reactive oxygen species，ROS)和丙二醛(malondialdehyde，MDA)水平，从而减轻氧化应激。机制研究显示，PCP通过激活葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2，GLUT2)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)信号通路，促进葡萄糖的摄取和利用，调节糖脂代谢，并增强抗氧化基因如核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2，NRF2)、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)和非竞争性氧化还原酶-1(non-Q-dependent reductase-1，NQO-1)的表达，从而改善氧化应激状态。通过葡萄糖转运蛋白2(glucose transporter 2，GLUT2)敲低实验证实，PCP通过调控GLUT2表达来影响糖脂代谢和氧化应激。综上所述，茯苓多糖在糖尿病模型中表现出显著的抗高血糖、降脂和抗氧化作用，为茯苓多糖作为糖尿病辅助治疗药物的开发提供了科学依据。

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26. 冬虫夏草多糖的结构表征及改善胞葬功能障碍的作用与机制研究

杨兴茂, 杨采霞, 周小仝, 廖郑悦, 刘思静, 国锦琳

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1288-1297. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.002

摘要（325）

PDF（pc）（1850KB）（25）

基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ，PPAR-γ）探究冬虫夏草多糖（Cordyceps polysaccharides，CSP）对改善巨噬细胞胞葬功能的作用及机制。采用水提醇沉法提取CSP；利用高效液相凝胶色谱法、PMP柱前衍生高效液相色谱法、甲基化法分析CSP的分子量分布、单糖组成及糖苷键连接类型。通过CCK-8法、实时荧光定量PCR（real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）和流式细胞术分别测定CSP对巨噬细胞细胞活力、胞葬相关基因及胞葬功能的影响；采用间接免疫荧光法观察CSP对PPAR-γ的表达量和核定位的影响；利用小干扰RNA转染技术验证PPAR-γ在CSP改善胞葬功能中的作用。结果显示，CSP的总糖含量为72.9%，分子量分布为21.9、2 100 kDa及大于50 000 kDa；主要由葡萄糖、半乳糖和甘露糖三种单糖组成，含6种主要糖苷键。与模型组相比，CSP处理提高了胞葬相关基因TAM酪氨酸激酶受体（Tyro3/Axl/Mer receptor tyrosine kinase，TAM）和乳脂球表皮生长因子8（Milk fat globule-epidermal growth factor 8，Mfge8）的表达（P<0.05）以及巨噬细胞对凋亡细胞的胞葬能力（P<0.05）。免疫荧光结果表明CSP促进了PPAR-γ的蛋白表达（P<0.001）与核转位。敲低PPAR-γ后，逆转了CSP对巨噬细胞胞葬相关基因表达的促进作用。本研究表明CSP可能通过激活PPAR-γ信号通路增强氧化型低密度脂蛋白（Oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL）诱导的小鼠巨噬细胞胞葬作用。

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27. 鳢肠化学成分和抗神经炎活性研究

刘春, 姚敏, 金静维, 甘礼社, 昂松, 吴日辉, 李冬利

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1330-1338. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.006

摘要（323）

PDF（pc）（949KB）（26）

研究醴肠的化学成分和抗神经炎活性。本文采用D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶等柱色谱和半制备液相色谱等技术对鳢肠Eclipta prostrata 95%乙醇提取物的化学成分进行系统分离纯化，并结合核磁共振波谱数据以及与文献数据比对进行化合物的结构鉴定得到20个单体化合物，分别鉴定为：3,4-seco-olean-12-en-4-ol-3,28-dioic acid（1）、刺囊酸（2）、eclalbasaponin Ⅱ（3）、eclalbasaponin Ⅰ（4）、ecliptasaponin B（5）、eclalbasaponin Ⅳ（6）、eclalbasaponin Ⅵ（7）、eclalbasaponin Ⅶ（8）、香豌豆酚（9）、芹黄素（10）、蓟黄素（11）、川陈皮素（12）、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（13）、金色鲜胺醇酯（14）、plantagoguanidinic acid（15）、plumbagine B（16）、蟛蜞菊内酯（17）、松脂醇（18）、α-醛基三聚噻吩（19）、α-terthienylmethanol（20）。化合物1、14、15为首次从该植物中分离得到。之后利用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导小鼠小胶质BV2细胞模型评价了部分化合物的抗神经炎活性，发现化合物15能显著减少LPS诱导BV2细胞中的NO释放量，IC₅₀值为37.3 μmol/L，且无细胞毒性。胍类生物碱化合物15对LPS诱导的BV2细胞炎症具有一定的抗炎活性，且其抗炎活性为首次报道。

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28. 基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS结合网络药理学探讨半夏泻心汤入血成分及治疗脾虚型溃疡性结肠炎的作用机制

朱海燕, 杨福权, 左秦川, 房智彦, 黄丽莉, 淮文英, 王艳秋, 张天娥

天然产物研究与开发 2024, 36 (9): 1610-1624. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.9.017

摘要（317）

PDF（pc）（4803KB）（18）

研究通过建立脾虚型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）模型，采用液相芯片对大鼠血清中炎性细胞因子进行高通量检测，同时以HE染色对结肠组织进行炎症分级评分，验证半夏泻心汤（Banxia Xiexin Tang，BXT）对脾虚型UC的药理作用。随后利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q-Orbitrap HRMS）对BXT入血成分进行分析，并结合网络药理学，探究BXT治疗脾虚型UC的作用机制。结果显示，UC能够增加大鼠血清中细胞因子白细胞介素-1α（interleukin-1α，IL-1α）、白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）、白细胞介素-18（interleukin-18，IL-18）、干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）表达水平；BXT可降低血清炎性细胞因子含量，且BXT高剂量组（20 g/kg）下降最明显，无明显炎细胞浸润，表明BXT对脾虚型UC具有一定的治疗作用。大鼠血清中发现入血成分共20个；网络药理学筛选出BXT治疗UC相关靶点87个，涉及炎症反应、炎症反应调节、微生物反应等生物过程，参与了IL-17、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF等信号通路。综上可知，BXT治疗脾虚型UC可能与抑制肠道炎症、调节肠道微生物及保护肠道屏障等多个途径相关，从而达到治疗UC效果。

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29. 老瓜头乙酸乙酯提取部位化学成分及其抗氧化与酪氨酸酶抑制活性研究

孙茹茹, 杨静玲, 南泽东, 江志波, 马晓莉

天然产物研究与开发 2024, 36 (9): 1512-1518. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.9.006

摘要（312）

PDF（pc）（768KB）（14）

为挖掘药用植物老瓜头的活性成分，对老瓜头全草的乙酸乙酯提取部位进行化学成分分离，并考察其抗氧化和酪氨酸酶抑制活性。采用各种色谱手段从中分离得到10个化合物，通过波谱学方法鉴定结构为3-甲氧基-4-羟基苯乙酮（1）、3,4-二甲氧基苯乙酮（2）、6,7-二甲氧基香豆素（3）、6-甲氧基-7-羟基香豆素（4）、对羟基苯丙酮（5）、对羟基苯乙酮（6）、10a,12a-dimethyl-4,4a,4b,10b,11,12-hexahydro-3H-naphtho［2,1-f］chromene-2,8-dione（7）、ent-13S-hydroxy-16-atisene-3,14-dione（8）、3-吲哚甲醛（9）、反式肉桂酸（10）。其中化合物7~10为首次从老瓜头中分离得到。分别通过DPPH自由基清除法和酪氨酸酶催化左旋多巴氧化速率法考察化合物的抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性。结果表明化合物1、2、4和5对DPPH自由基有一定的清除能力，其IC₅₀分别为37.3、44.3、51.4、48.2 μg/mL。化合物1、2、3、4和6对酪氨酸酶有显著的抑制作用，其IC₅₀分别为15.7、22.3、8.3、7.1、39.8 μg/mL，均强于阳性对照熊果苷。

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30. 原花青素对大鼠运动性心肌损伤的保护作用及机制研究

任鹏, 林丹丹, 聂煜, 王一峰, 董诗稳, 王博源

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1401-1408. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.014

摘要（309）

PDF（pc）（1223KB）（10）

该文研究了原花青素（oligomeric proanthocyanidins，OP）对长时间、大强度运动导致的心肌损伤的保护作用及其潜在机制。Wistar大鼠进行连续6周过量游泳运动训练，其中2组大鼠每天分别灌胃50 mg/kg OP（OP50组）和100 mg/kg OP（OP100组），模型组（model，Mod）灌胃等体积生理盐水，正常组（normal，Nor）作为对照。结果表明，Mod组血清中运动性心肌损伤标记物乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）及心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin，cTnI）显著升高，心肌组织出现明显病理形态，呈现明显炎性细胞浸润；OP50及OP100组中LDH、CK及cTnI显著下调，心肌组织病理变化明显减轻（P<0.05）。心肌组织中，Mod组丙二醛（malondialdehyde，MDA）明显上升，抗氧化物酶谷胱甘肽（glutathione，GSH）及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）下降，核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2 related factor 2，Nrf2）/血红素加氧酶-1（hemeoxygenase-1，HO-1）（Nrf2/HO-1）抗氧化应激信号通路中关键蛋白的表达量显著下降；OP50及OP100组中MDA含量显著下调，GSH及SOD显著上调，Nrf2/HO-1通路中蛋白表达量显著增多（P<0.05）。Mod组血清及心肌中炎症指标肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）含量明显上升，硫氧还蛋白互作蛋白/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（thioredoxin-interacting protein/NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3，TXNIP/NLRP3）炎症反应信号通路中关键蛋白的表达量显著上升；OP50及OP100组中炎症因子含量均显著下调，OP100组中TXNIP/NLRP3通路中蛋白表达量显著降低（P<0.05）。综上所述，补充OP对大鼠运动性心肌损伤具有明显的保护作用，且这种保护机制与增强心肌Nrf2/HO-1抗氧化通路及抑制TXNIP/NLRP3炎症反应信号通路有关。

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31. 基于网络药理学和UPLC指纹图谱的紫苏质量标志物（Q-Marker）预测

张良琦, 陈凡, 张子桉, 林云, 周春娇, 汤卓翰, 江星明, 肖美凤

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1800-1812. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.016

摘要（306）

PDF（pc）（3603KB）（13）

基于UPLC指纹图谱和网络药理学法分析并筛选紫苏潜在质量标志物（Q-Marker）。首先建立15批紫苏叶及14批紫苏梗的指纹图谱，并对不同来源、批次的紫苏叶和紫苏梗中的成分及含量进行比较，标定紫苏不同部位指纹图谱的共有峰和非共有峰；采用网络药理学法构建紫苏“成分-靶点”网络图，并构建靶点蛋白互作网络图，预测紫苏Q-Marker。本研究建立的紫苏不同部位的指纹图谱，共检测到了5种成分，其中迷迭香酸、咖啡酸、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素-7-O-二葡萄糖醛酸苷为叶和梗的共有成分，芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷为紫苏叶特有成分。筛选得到包括MAPK1、PIK3CA等在内的14个核心靶点，对以上靶点进行GO和KEGG功能分析可知涉及肿瘤坏死因子、新冠肺炎、脂质和动脉粥样硬化等通路，最后构建“成分-靶点-通路”网络图，选取排名前4的靶蛋白与4个成分进行分子对接验证，结果显示成分与蛋白之间具有十分良好的结合性能。本实验基于UPLC法建立紫苏不同部位多成分含量测定方法，此方法操作简单、准确度高，可作为紫苏质量检测的参考方法；同时结合网络药理学和分子对接技术预测迷迭香酸、咖啡酸、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素-7-O-二葡萄糖醛酸苷为紫苏潜在质量标志物，以此来评价紫苏“多成分-多靶点-多通路”的协同作用，为紫苏的质量控制提供了理论依据，同时也为后续的紫苏药效物质基础和作用机制提供坚实的基础。

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32. 滇产南方红豆杉枝叶中紫杉烷二萜化学成分及其骨髓瘤细胞毒活性研究

刘林, 黄建宜, 郭峰, 臧浩景, 郝小江, 邸迎彤

天然产物研究与开发 2024, 36 (8): 1320-1329. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.8.005

摘要（304）

PDF（pc）（910KB）（32）

为了研究滇产南方红豆杉中紫杉烷二萜类成分及其骨髓瘤细胞毒活性，运用正相、反相以及排阻色谱等分离手段对南方红豆杉枝叶提取物的化合物进行分离和纯化，通过NMR等波谱手段鉴定化合物结构，并采用CCK-8法分析化合物体外抑制NEK2过表达骨髓瘤细胞增殖作用。从该植物中分离鉴定了16个紫杉烷二萜类化合物，分别为13-肉桂酰基-1-脱羟基巴卡丁Ⅳ（1）、紫杉素（2）、5α-桂皮酰氧基-9α，10β，13α-三乙酰氧基紫杉-4（20），11-二烯（3）、紫杉宁E（4）、hongdoushan A（5）、11-diene-2α,5α,9α,10β,13β-pentol-2α,9α,10β,13α-tetraacetate-5α-cinnamate（6）、taxezopidine H（7）、紫杉素 B（8）、taxuyunnanine C（9）、1-deoxybaccatin VI（10）、19-羟基巴卡丁III（11）、巴卡丁III（12）、7，9，13-三去乙酰基巴卡丁VI（13）、10-脱乙酰基巴卡丁 III（14）、紫杉醇（15）、7-表紫杉醇（16），其中化合物1为新化合物，化合物5、13为首次从南方红豆杉中分离得到，化合物2、6、7、11有明显的抑制NEK2过表达骨髓瘤细胞增殖作用（IC₅₀=24.0、23.5、26.1、18.3 μmol/L），化合物16的抑制作用尤为显著（IC₅₀=0.6 μmol/L）。

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33. 牛皮消蓼的化学成分研究

严文思, 张妍, 古培珊, 曾子谦, 何鑫, 苏向东, 薛永波

天然产物研究与开发 2024, 36 (9): 1519-1527. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.9.007

摘要（300）

PDF（pc）（702KB）（19）

采用正相和反相硅胶柱色谱、半制备型高效液相色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱等分离技术，从蓼科药用植物牛皮消蓼（Fallopia cynanchoides (Hemsl.) Harald. var. cynanchoides）中分离得到17个化合物，并通过核磁共振、质谱等多种波谱学技术鉴定化合物的化学结构，分别为lyoniresinol（1）、β-D-(1-O-acetyl-3,6-O-trans-diferuloyl)-fructofuranosyl-α-D-2′,4′,6′-O-triacetylglucopyranoside（2）、反式阿魏酸对羟基苯乙酯（3）、(3S,5R,6S,7E)-3,5,6-trihydroxy-7-megastigmen-9-one（4）、2，3-二羟基-1-（4-羟基-3,5-二甲氧基苯基）-1-丙酮（5）、2-methyl-5-(2′-oxo-4′-hydroxypentyl)-7-hydroxychromone（6）、2-(2′-hydroxypropyl)-5-methyl-7-hydroxychromone（7）、2,5-dimethyl-7-hydroxychromone（8）、2-methyl-5-acetonyl-7-hydroxychromone（9）、大黄素（10）、槲皮素（11）、（+）-花旗松素（12）、3，7-二甲氧基-5，3′，4′-三羟基黄酮（13）、咖啡酸甲酯（14）、原儿茶酸乙酯（15）、(2aS,3aS)-lyciumamide D（16）和3-acetyl-4,5-dimethoxy-benzoic acid（17）。化合物1~7、9、13、14、16、17为首次从何首乌属植物中分离得到，化合物1~9、11~17为首次从牛皮消蓼中分离得到。体外抗氧化活性评价结果显示，牛皮消蓼的70%乙醇提取物具有一定的ABTS+自由基清除能力，IC50为14.21 μg/mL；化合物1~3、11、13~17具有一定的ABTS⁺自由基清除能力，其中化合物1、13、14的IC50优于阳性对照水溶性维生素E（IC₅₀=23.55 μmol/L），分别为15.30、16.97和17.53 μmol/L。本研究为药用植物牛皮消蓼的开发与利用提供了科学依据。

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34. 牡丹皮正丁醇部位化学成分研究

陆彩侠, 孔垂皓, 唐旭, 吴丝雨, 张翠, 吴德玲, 王仁中, 许凤清

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1714-1720. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.008

摘要（295）

PDF（pc）（603KB）（10）

研究牡丹皮85%乙醇提取物正丁醇萃取部位化学成分及其抗炎、抗菌的活性。采用大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱结合反相中压柱色谱和半制备色谱技术，分离纯化牡丹皮的正丁醇萃取部位，并利用核磁共振波谱、质谱数据与文献比对鉴定化合物的结构。从牡丹皮乙醇提取部位的正丁醇萃取物中得到16个化合物，分别为5-hydroxy-3S-hydroxymethyl-6-methyl-2,3-dihydrobenzofuran（1）、(S)-（6-methyl-2,3-dihydrobenzofuran-3-yl）methanol（2）、4-thujone-7-hydroxyl-8-O-β-D-glucopyranoside（3）、resacetophenone（4）、acetoisovanillone（5）、2,5-二羟基-4-甲氧基-苯乙酮（6）、3-(4-hydroxy-3-methoxy phenyl) propan-1,2-diol（7）、erythro-1-(3-methoxy-4-hydroxy-phenyl)-propan-1,2-diol（8）、thero-1-(3-methoxy-4-hydroxy-phenyl)-propan-1,2-diol（9）、(+)-儿茶素（10）、(+)-儿茶素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（11）、对羟基苯甲酸-β-D-吡喃葡萄糖苷（12）、苯甲酸-β-D-吡喃葡萄糖苷（13）、没食子酸乙酯（14）、没食子酸甲酯（15）、香草酸（16）。化合物2、7~9和11~16均首次从芍药属中分离得到。活性筛选发现化合物1能够抑制脂多糖诱导的RAW 264.7细胞中的炎症因子水平（NO、TNF-α和IL-6），其IC₅₀值分别为15.67±1.20、18.59±1.27和15.79±1.20 μmol/L。

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35. 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS及网络药理学探讨多裂骆驼蓬治疗阿尔茨海默病的有效成分和作用机制

程亚敏, 黄丹蓉, 任静玉, 冯紫涵, 周文斌, 申刚义

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1787-1799. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.015

摘要（292）

PDF（pc）（2584KB）（16）

本研究通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）、网络药理学及分子对接技术探讨多裂骆驼蓬抗阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease，AD）药效物质基础及作用机制。利用 UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对多裂骆驼蓬进行定性研究；结合质谱分析结果，利用SWISS ADME、GeneCards等数据库筛选多裂骆驼蓬活性成分、对应靶点及疾病靶点；利用Venn绘制平台获取交集靶点，并导入STRING在线分析平台和Cytoscope3.9.1软件，进行蛋白质相互作用分析，构建药物-成分-靶点网络；利用AlzDate数据库差异表达模块分析靶点的表达与β-淀粉样蛋白（β-amyloids，Aβ）和微管相关蛋白（Tau）相关病理学的关系；通过DAVID数据库进行GO和KEGG通路富集分析；利用Autodock Vina软件实现核心靶点与有效成分分子对接模型的构建。从多裂骆驼蓬中共鉴定出34个主要成分，包括生物碱类10种，黄酮类5种，氨基酸类5种，萜类5种，核苷类2种，酚酸类3种，其他类化合物4种。网络药理学分析结果显示，吴茱萸碱、β-谷甾醇、β-豆甾醇酮和去氢骆驼蓬碱等活性成分可通过作用靶点调节一系列与AD发病机制相关的生物学过程、分子功能和信号通路，进而调节胆碱能系统和功能、减少Aβ损伤、调节微循环及神经元结构和功能发挥治疗AD的作用。分子对接显示有效成分吴茱萸碱、β-谷甾醇、β-豆甾醇酮和去氢骆驼蓬碱与核心靶点MAPK3和STAT3均具有良好的结合活性。该研究初步揭示了多裂骆驼蓬治疗AD的药效物质基础及作用机制，为临床应用和药物开发提供了依据。

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36. 莲子心中具有心肌细胞保护活性的化学成分研究

李佳东, 高晗, 李英哲, 张贵兰, 吴弢

天然产物研究与开发 2024, 36 (7): 1158-1165. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.7.007

摘要（287）

PDF（pc）（832KB）（15）

为了寻找莲子心（Nelumbinis Plumula）具有心肌细胞保护活性的化学成分，本研究采用多种柱色谱技术分离和纯化莲子心的80%乙醇提取物，运用¹H NMR、¹³C NMR等波谱技术和文献数据比对鉴定化合物结构，并对化合物进行心肌细胞保护活性筛选。从莲子心80%乙醇提取物分离纯化得到14个化合物，分别鉴定为柚皮苷（1）、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷（2）、芹菜素-6-C-β-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-葡萄糖苷（3）、木犀草素-7-O-β-D-新橙皮苷（4）、木犀草素-3′-O-β-D-葡萄糖苷（5）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷（6）、橙皮苷（7）、异夏佛塔苷（8）、松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷（9）、对香豆酸-4-O-β-D-葡萄糖苷（10）、对香豆酸（11）、苯乙基 6-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-β-D-葡萄糖苷（12）、淫羊藿次苷D1（13）、淫羊藿次苷 F2（14）。化合物1~6、9、11~14均为首次从莲子心中分离得到。黄酮类化合物1~8对缺氧/复氧损伤下的小鼠HL-1心肌细胞具有明显的保护作用，对小鼠 HL-1-STAT3-Luc 细胞中 STAT3 的表达也具有促进作用，且均具有剂量依赖性。

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37. 菊花的化学成分、药理活性及应用研究进展

吕轲, 王忠华

天然产物研究与开发 2024, 36 (增刊1): 173-181.

摘要（285）

PDF（pc）（1240KB）（21）

菊花是菊科植物菊（Chrysanthemum morifolium）的干燥头状花序，自古以来既作为观赏性植物被人们熟知，又作为一种药食同源的植物，而实用性菊花依据应用方式又可分为药用菊、食用菊和茶用菊三类。2010版《中华人民共和国药典》将菊花收入为药食同源植物，由于其产地、生长环境不同，分为贡菊、杭菊、滁菊、亳菊、怀菊五大药用品种。就目前而言，药用菊花的研究并不算多，药用菊的种质资源工作不全面。本文就菊花的主要成分、生物学作用、参与生物合成途径近年的研究进展进行分析综述。

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38. 基于多指标成分定量和化学模式识别综合评价杜仲叶质量

储瑞, 范久余, 夏悦, 文兴建, 李胜容, 励娜

天然产物研究与开发 2024, 36 (10): 1670-1678. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.10.003

摘要（284）

PDF（pc）（1544KB）（16）

通过建立HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，运用层次分析法（analytic hierarchy process，AHP）建立一种中药多指标综合评价杜仲叶质量的方法，并优选最佳采收期。采用HPLC法测定杜仲叶中绿原酸、京尼平苷酸、松脂醇二葡萄糖苷、芦丁、槲皮素5种指标性成分的含量；紫外分光光度（UV）法测定总黄酮含量；按《中国药典》测定醇溶性浸出物的含量。研究结果显示：杜仲叶中总黄酮含量在8月达到最高，绿原酸含量在6月达最大值，松脂醇二葡萄糖苷与芦丁含量在9月含量最高，综合得分较高的月份为6月、8~11月。通过主成分分析（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least square discriminant analysis，OPLS-DA），比较杜仲叶中多种化学成分的含量差异，发现杜仲叶在不同采收时期，各成分含量差异大。本研究为优选杜仲叶采收时间建立了一种整体、全面的综合评分模型，可根据具体使用需求，对其中单一或者多个化学成分指标的权重进行主观调整，进而能够更好地指导实际生产与应用；所建立的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法简单易行，为杜仲叶质量控制和开发利用提供参考。

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39. 灵芝多糖对糖尿病肾病小鼠的改善作用及机制研究

马广礼, 夏晓培

天然产物研究与开发 2024, 36 (6): 938-945. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.6.003

摘要（281）

PDF（pc）（1796KB）（16）

研究了灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide，GLP）对糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）小鼠的作用。成功构建DN小鼠模型后GLP干预。检测小鼠空腹血糖和24 h尿蛋白含量，测定尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）和肌酐（serum creatinine，Scr）水平，结合伊红和马松染色观察肾脏病理形态，采用酶联免疫吸附试验测定肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）和白细胞介素10（interleukin-10，IL-10）的水平，使用蛋白免疫印迹法检测晚期糖基化终产品受体（receptor for advanced glycation end-products，RAGE）、Ⅳ型胶原蛋白（collagen type IV，COL-Ⅳ）和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）蛋白的表达含量。DN组小鼠空腹血糖、24 h尿蛋白、BUN和Scr及其肾组织中TNF-α和IL-6水平均升高（P<0.05），血清中IL-10水平降低（P<0.05），RAGE、COL-Ⅳ和iNOS蛋白的表达量升高（P<0.05）；而治疗组小鼠病理损伤及纤维化改变均有改善，定量指标得到好转。GLP可以改善DN小鼠，机制与抑制RAGE信号通路有关。

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40. 基于UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS和网络药理学探讨肉苁蓉水提物治疗糖尿病肾病的作用机制

刘天华, 耿若愚, 赵耀, 王百才, 马冲, 杨建华, 胡君萍

天然产物研究与开发 2024, 36 (7): 1242-1256. DOI: 10.16333/j.1001-6880.2024.7.017

摘要（266）

PDF（pc）（2643KB）（16）

探究肉苁蓉水提物（the aqueous extract of Cistanche tubulosa，AECT）化学成分和AECT治疗糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）的作用机制。利用UPLC- MS/MS对化合物进行分析鉴定；借助PubChem、GeneCards、OMIM、DAVID等数据库预测有效成分防治DN的作用靶点及通路，对核心基因进行GO、KEGG富集分析，并使用Cytoscape软件构建“成分-靶点-通路”可视化网络图。MTT法测定AECT的抗DN活性；生化试剂盒检测过氧化指标超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxide，GSH-Px）含量水平；ELISA法检测炎症因子白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和转化生长因子（transforming growth factor-β，TGF-β）水平；Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率；Western blot检测相关蛋白的表达。从AECT中共鉴定出84个化学成分，并推测出15个化合物可能的裂解途径；筛选出AECT治疗DN的70个潜在靶点和多个信号通路。体外实验发现AECT能够增加高糖高脂环境中的HK-2细胞存活率抑制细胞凋亡；并上调SOD活性和GSH-Px含量，抑制炎症因子IL-1β、TNF-α和TGF-β表达水平；Western blot结果证明AECT影响PI3K-AKT信号通路。本研究初步探明了AECT中的主要有效成分及其治疗DN的潜在靶点与作用机制，为AECT治疗DN后续的深入研究提供思路。

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