摘要:
基于无翅型MMTV整合位点家族(wingless-type MMTV integration site family,Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)通路分析通关藤C21甾体皂苷(Marsdenia tenacissima C21 steroid saponins,MTC21)对卵巢癌细胞顺铂耐药的影响及相关分子机制。取对数期生长卵巢癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞株SKOV3/DDP细胞,采用CCK-8法检测不同浓度DDP(0、1、2、4、8、16 μg/mL)干预下SKOV3/DDP细胞的增殖情况。分别设置对照组(control group,Con)、顺铂组(DDP,2 μg/mL)及MTC21低剂量组(MTC21 in Low-dose group,L-MTC21)、MTC21中剂量组(MTC21 in Medium-dose group,M-MTC21)、MTC21高剂量组(MTC21 in High-dose group,H-MTC21)(分别给予2 μg/mL的DDP及0.05、0.2、0.8 mg/mL MTC21干预)。采用流式细胞法检测各组细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence
quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及蛋白免疫印迹(Western blot,WB)法检测Wnt、β-catenin mRNA和蛋白的表达情况。量效曲线显示,Con组DDP对SKOV3/DDP细胞的半数抑制浓度(50% concentration of inhibition,IC50)为10.9 μg/mL,而L-MTC21、M-MTC21及H-MTC21组的IC50分别为9.1、8.3、6.5 μg/mL,随MTC21浓度升高DDP对细胞的IC50值降低,其中H-MTC21组IC50值最低。与Con组比较,DDP组、L-MTC21、M-MTC21及H-MTC21组细胞凋亡率升高(P<0.05),Wnt和β-catenin mRNA及蛋白表达量降低(P<0.05);与DDP组比较,L-MTC21、M-MTC21及H-MTC21组细胞凋亡率升高(P<0.05),Wnt和β-catenin mRNA及蛋白表达量降低(P<0.05);与L-MTC21组比较,M-MTC21组、H-MTC21组细胞凋亡率升高(P<0.05),Wnt和β-catenin mRNA及蛋白表达量降低(P<0.05);与M-MTC21组比较,H-MTC21组细胞凋亡率升高(P<0.05),Wnt和β-catenin mRNA及蛋白表达量降低(P<0.05)。综上所述,MTC21可增加卵巢癌SKOV3/DDP细胞对DDP化疗的敏感性,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路有关。
中图分类号:
R282
R937.31
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